裸鼠成瘤實驗實驗室常用的是BALB/c-nu裸小鼠 ,隨著裸小鼠年齡增長或有關(guān)因素的影響(如病毒感染),裸鼠體內(nèi)正常T細胞會增加，故接種腫瘤實驗一般采用4--6周齡的裸鼠。

裸鼠成瘤實驗技巧
1、細胞的狀態(tài)是成瘤實驗的關(guān)鍵，所以細胞生長狀態(tài)一定要好，取處于對數(shù)生長期的細胞，細胞達80-90%左右密度為宜。收集細胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基。
2、胰酶消化細胞后用預(yù)冷的PBS洗兩遍，目的為去除細胞中殘余的血清。
3、用PBS或者無血清培養(yǎng)基吹打細胞沉淀至合適的濃度，一般皮下瘤接種的細胞量為1-5×10^6個細胞/支，接種體積為0.1-0.2ml，因此細胞懸液的濃度為1-5×10^7個細胞/ml，如若有條件的實驗室，也可以加基質(zhì)膠以加速瘤塊的生成，基質(zhì)膠與PBS或無血清的比列為1:1。

4、細胞消化后應(yīng)盡快接種到裸鼠皮下，一般盡量在半小時內(nèi)完成（如果接種量大，可以分批接種），途中將細胞懸液放在冰上降低細胞的代謝以保持細胞的活性。
5、選擇的裸鼠一般在4-6周齡，體重16-18g左右，種植部位選擇血供豐富區(qū)域，如腋窩中后部。

6、接種前用槍將細胞懸液充分的吹散，防止細胞成團而降低細胞成活率，并且導(dǎo)致小鼠接種細胞數(shù)量的差異過大。

7、接種時，針頭在皮下進針深一點，約1cm深，針頭在皮下左右滑動幾次，以便細胞接種成團，減少注射后細胞懸液從針眼溢出。

8、如何保定裸鼠?左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚，小拇指夾住裸鼠尾巴。

9、接種后1-2周左右可以見到皮下開始出現(xiàn)腫塊。

10、根據(jù)腫瘤細胞的特性和接種細胞的量，一般皮下成瘤的周期為1-2個月。腫瘤不宜生長過大，一般不要超過2000mm3。

11、腫瘤大小測量一般為1周兩次，游標卡尺測量腫瘤最長和最短部位。V=1/2*a*b2 (a為長軸，b為短軸)。

12、皮下瘤取下后一部分凍液氮用作以后提蛋白和RNA，一部分福爾馬林固定用做免疫組化、免疫熒光等。

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