凋亡檢測實(shí)驗(yàn)的目的：
      掌上細(xì)胞凋亡細(xì)胞的形態(tài)特征
      通過實(shí)驗(yàn)通過用熒光探針對細(xì)胞進(jìn)行雙重標(biāo)記來檢測正常的活細(xì)胞，凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞的方法。

1、取Falcon試管，按標(biāo)本順序編好陰性對照管和標(biāo)本管號。

2、使用冷的PBS緩沖液洗細(xì)胞兩次，再用1xBinding Buffer緩沖液制成1x106細(xì)胞/ml的懸液。試劑由優(yōu)寧維生物提供。

3、Falcon試管中加入100μl 細(xì)胞懸液。

4、按以下體積加入AnnexinV與核酸染料：

5、輕輕混勻，室溫（20°C ~25°C）避光處放置15分鐘。

6、使用Annexin V-Biotin試劑進(jìn)行檢測時(shí): 
       1xBinding Buffer緩沖液洗細(xì)胞一次，去上清。 
       1xBinding Buffer緩沖液100µl溶解SAv-FITC試劑0.5µg，加入到細(xì)胞管中。 
       輕輕混勻。加入5µl PI，室溫（20-25°C）避光處放置15分鐘。 

7、各試驗(yàn)管中分別加入1xBinding Buffer緩沖液400µl。1小時(shí)內(nèi)上流式細(xì)胞儀測定結(jié)果。

注意事項(xiàng)：

1、誘導(dǎo)培養(yǎng) HL-60 細(xì)胞時(shí)間要準(zhǔn)確；
2、熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí)，由于熒光易碎滅，觀察時(shí)要盡量快。